მორევა არ გათიშავს თქვენს რნმ-ს, რათა ის გამოუსადეგარი გახდეს, თუ შემთხვევით პრაიმინგის RT-ს აკეთებთ - მხოლოდ იმ შემთხვევაში, თუ გსურთ გრძელი mRNA-ს კლონირება. Invitrogen ტექნიკური მხარდაჭერა ასევე სწორია. ქლოროფორმი უფრო მძიმეა ვიდრე ტრიზოლი და ჩაიძირება მილის ძირში.
უსაფრთხოა თუ არა რნმ-ის მორევა?
არ მოატრიალოთ ტრიზოლის ლიზატები ან რნმ-ის ნიმუშები, რათა თავიდან აიცილოთ გახეხვა. ექსტრაქციის შემდეგ რნმ-ის ნიმუშები ყოველთვის შეინახეთ ყინულზე. ეს პროტოკოლი შექმნილია 1 მლ ტრიზოლის ლიზირებული ნიმუშებისთვის 1.5 ან 2 მლ ტუბში.
შეგიძლიათ გაათბოთ რნმ?
ამიტომ, მოერიდეთ მაღალ ტემპერატურას ( +65°C-ზე მეტი), რადგან ეს გავლენას ახდენს რნმ-ის მთლიანობაზე. ამის ნაცვლად, მეორადი სტრუქტურების დნობის მიზნით, გაათბეთ რნმ +65°C-მდე 15 წუთის განმავლობაში დენატურული ბუფერების თანდასწრებით.
როგორ ხელახლა აჩერებთ რნმ-ის მარცვლებს?
ხელახლა გააჩერეთ თქვენი მარცვლები თბილი წყლით (40-50 გრადუსი ცელც.). ინკუბაცია 45 გრადუს ცელსიუსზე 10 წუთის განმავლობაში. განათავსეთ ისინი +4-ში 4-6 საათის განმავლობაში.
როგორ აგროვებთ რნმ-ს?
A.
მარილის კონცენტრაციის დარეგულირების შემდეგ, რნმ შეიძლება დალექილი იყოს 2,5 ტომი ეთანოლის ან 1 ტომი იზოპროპანოლის დამატებით და საფუძვლიანად შერევით, მოჰყვება გაგრილება მინიმუმ 15 წუთის განმავლობაში -20°C ტემპერატურაზე.
