როგორ გავაკეთოთ იმუნოფლუორესცენცია?

2024 ავტორი: Fiona Howard | [email protected]. ბოლოს შეცვლილი: 2024-01-10 06:39

შემდეგ არის მიმოხილვა არაპირდაპირი იმუნოფლუორესცენციის შეღებვის პროტოკოლის სხვადასხვა საფეხურზე

1. ექსპერიმენტის დაგეგმვა და ნიმუშის მომზადება. …
2. ნიმუშის ფიქსაცია. …
3. უჯრედების გამტარიანობა. …
4. დაბლოკვა. …
5. პირველადი ანტისხეულების ინკუბაცია. …
6. მეორადი ანტისხეულების ინკუბაცია. …
7. კონტრასფერი და მონტაჟი.

როგორ ასრულებთ იმუნოფლუორესცენციას?

ყველა ინკუბაციური ნაბიჯი ხდება ოთახის ტემპერატურაზე

1. გარეცხეთ უჯრედები ორჯერ და გამოიყენეთ პინცეტი, რათა ფრთხილად მოათავსოთ გადასაფარებელი ამობრუნებული უჯრედებით დატენიანებულ კამერაში.
2. შეასწორეთ 4% ფორმალდეჰიდით 10 წუთის განმავლობაში და გარეცხეთ 3 ×.
3. გაჟღენთვა 0.1% TX-100/PBS 15-20 წუთის განმავლობაში და დაიბანეთ 3 ×.

როგორ იყენებთ იმუნოფლუორესცენციას უჯრედში?

იმუნოფლუორესცენციის პროტოკოლი ადჰერენტული უჯრედებისთვის

1. თესლი 1–1,5 x10⁴ უჯრედი 4-კამერიანი სლაიდის თითო ჭაბურღილში 500 მლ კულტურის გარემოში. ინკუბაცია 37°C-ზე 5% CO_2.
2. უჯრედის დათესვიდან 32–36 საათის შემდეგ, ამოიღეთ უჯრედის კულტურის საშუალება და ჩამოიბანეთ უჯრედები 3-ჯერ 500 μL 1X PBS-ის გამოყენებით.

რა არის იმუნოფლუორესცენციის მაგალითი?

მაგალითად, მკვლევარმა შეიძლება შექმნას პირველადი ანტისხეულები თხაში, რომელიც ამოიცნობს რამდენიმე ანტიგენს და შემდეგ გამოიყენოს საღებავით შეწყვილებული კურდღლის მეორადი ანტისხეულები, რომლებიც ცნობენ თხის ანტისხეულების მუდმივ რეგიონს ( კურდღლის თხის საწინააღმდეგო ანტისხეულები).

რა სარგებლობა მოაქვს იმუნოფლუორესცენტულ შეღებვას?

იმუნოფლუორესცენციის (IF) შეღებვა არის ფართოდ გამოყენებული ტექნიკა ბიოლოგიურ კვლევასა და კლინიკურ დიაგნოსტიკაში IF იყენებს ფლუორესცენტურად მონიშნულ ანტისხეულებს კონკრეტული სამიზნე ანტიგენების გამოსავლენად. გამოსახულების შემდეგ, ეს არის ძალიან პირდაპირი ტექნიკა, რადგან თქვენ შეგიძლიათ რაღაცის დანახვა.